70% 乙醇在密封容器中用于蜜蜂样本采集时，主要功能是脱水、固定和生物保存剂。它能迅速渗透蜜蜂组织，立即阻止生物腐烂，抑制微生物生长，并确保样本在从蜂场到实验室的运输过程中保持稳定。
核心见解：70% 乙醇不仅仅是一种储存液；它是一种活性化学固定剂，可以锁定样本的生物状态，保护 DNA 的完整性以进行分子诊断，并物理固定寄生在宿主身上的外部寄生虫，以确保准确的病原体计数。
生物保存和固定
快速组织渗透
70% 乙醇的有效性取决于其快速渗透蜜蜂外骨骼和组织的能力。
通过快速进入组织，它能在采集后立即阻止生物过程，防止死亡后自然发生的降解。
防止样本腐烂
在常温运输条件下，生物样本容易腐烂和细菌过度生长。
乙醇创造了一个抑制微生物继发增殖的环境，确保到达实验室的标本代表捕获时的蜜蜂状态，而不是腐烂的样本。
保护遗传完整性
用于诊断的 DNA 保存
对于进行分子诊断的研究人员来说，乙醇的主要价值在于保护DNA 完整性。
它保存了宿主蜜蜂（包括线粒体 DNA）和存在的任何病原体的遗传物质，为成功的 PCR 和其他分子实验提供了高质量的模板。
抑制酶活性
生物降解通常由分解细胞结构的内部酶驱动。
乙醇作为一种固定剂，可以抑制酶活性，防止这些酶在转移过程中降解敏感的遗传物质。
增强病原体检测
固定体外寄生虫
在寄生虫调查中，特别是针对瓦螨，乙醇的固定特性对于准确性至关重要。
乙醇能立即固定样本，防止螨虫从宿主身上脱落或逃逸。之后，这使得实验室可以通过机械振动瓶子来分离和准确计数螨虫。
稳定微观形态
对于像鼻孢子虫这样的肠道寄生虫的检测，病原体的物理结构对于识别至关重要。
乙醇稳定鼻孢子虫孢子的形态，确保它们在显微镜计数过程中保持完整和可识别。
操作注意事项和局限性
密封容器的功能
虽然乙醇可以保存样本，但密封容器是该系统的机械组成部分。
它防止蜜蜂和病原体意外逃逸，防止乙醇蒸发，并保护样本免受可能污染化学分析的外部污染物的影响。
不适用于活体测试
区分保存用于分析和用于活体测试至关重要。
由于乙醇是一种致命的固定剂，因此以这种方式收集的样本不适用于需要观察活体生物活性或行为反应的毒理学测试。
为您的目标做出正确选择
为了最大限度地利用 70% 乙醇收集的样本的效用，请将您的下游处理与保存方法相匹配：
- 如果您的主要重点是分子分析：确保样本立即完全浸没，以停止酶活性并保护宿主和病原体的DNA 完整性。
- 如果您的主要重点是寄生虫计数：依靠乙醇在运输过程中将瓦螨固定在宿主身上，然后在实验室中通过机械振动将其分离以进行准确量化。
乙醇是现场条件和实验室精度之间的桥梁，将生物体转化为稳定的数据点。
总结表：
| 功能 | 机制 | 对分析的好处 |
|---|---|---|
| 生物固定 | 快速组织渗透 | 阻止腐烂并抑制微生物生长 |
| 遗传保存 | 酶抑制 | 保护 DNA 完整性以进行分子诊断（PCR） |
| 寄生虫固定 | 立即固定宿主 | 防止瓦螨脱落，以便准确计数 |
| 形态稳定性 | 结构稳定 | 确保鼻孢子虫孢子保持完整以进行显微镜检查 |
| 密封 | 密封环境 | 防止蒸发并避免外部污染 |
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参考文献
- Dylan Cleary, Allen L. Szalanski. Molecular Diagnostic Survey of Honey Bee, <i>Apis mellifera</i> L., Pathogens and Parasites from Arkansas, USA. DOI: 10.2478/jas-2022-0014
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
