精密探针在针刺杀幼虫测定法中的主要功能是机械性地终止封盖巢房内发育中的幼虫或蛹，同时保持蜡质封盖在结构上完整。这种特定的操作创造了一个可控的死亡事件，作为触发和测量工蜂卫生反应的必要刺激。
通过模拟内部幼虫死亡而不造成明显的外部损伤，精密探针使养蜂人能够通过嗅觉线索来隔离蜂群检测腐烂的能力。这为选育具有卓越抗病能力的育种群体提供了一个标准化的、定量的指标。
测定法的机械原理
创造可控的刺激
探针的核心目标是在蜂箱内模拟死亡或患病幼虫的存在。
通过刺穿幼虫，探针物理性地终止了幼虫或蛹的生命。这启动了分解过程，释放出工蜂在基因上被编程为检测到的特定化学信号。
保持封盖的完整性
至关重要的是，探针必须在不损害蜡质巢房封盖的情况下杀死幼虫。
如果封盖被压碎或严重撕裂，工蜂会仅仅因为结构损坏而修复或移除它。通过使用精细、高精度的仪器，该测定法确保工蜂仅因为检测到内部的死亡幼虫而揭开巢房，而不是因为外部机械故障。
定量遗传评估
探针的使用将行为观察转化为可测量的数据。
通过制造已知数量的死亡幼虫（刺激），育种者可以在24小时后返回计算有多少巢房被揭开并清理。这得出了一个代表蜂群“卫生评分”的具体百分比，直接与其对幼虫疾病的防御效率相关。
标准化与效率
确保均匀的穿刺
为了获得可靠的数据，施加到每个巢房的物理创伤必须一致。
专门的针刺工具，例如制造菱形穿刺的工具，确保致命的伤害均匀施加。这种标准化可以防止某些幼虫存活或被撕碎等变量，从而扭曲行为数据。
使用多针工具进行扩展
对于商业或大规模评估，手动单针测试会引入时间变量。
诸如100针针刺刷之类的工具通过同时对大面积幼虫造成一致的机械损伤来解决这个问题。这消除了第一针和最后一针之间的时间延迟，确保所有目标幼虫在同一时刻进入分解阶段。
理解权衡
机械创伤与病理死亡
重要的是要认识到，针刺杀幼虫测定法使用机械创伤作为疾病的替代指标。
虽然有效，但机械杀死幼虫释放的化学信号可能与因美国溃疡病等病原体缓慢死亡的幼虫释放的信号略有不同。然而，它仍然是行业标准，因为它避免了将实际的传染性病原体引入蜂箱。
精度与速度
使用多针工具可以提高速度，但需要仔细对齐。
100针工具的对齐不当可能会损坏巢房壁而不是幼虫，或者完全错过幼虫。大规模测试工具的效率必须与操作员确保每根针准确击中目标的需要相平衡。
为您的目标做出正确选择
要将此方法有效地应用于您的育种或研究项目，请考虑您的具体目标：
- 如果您的主要重点是商业选育：优先考虑多针工具（如100针刷），以最大限度地提高吞吐量并消除大样本量中的时间延迟变量。
- 如果您的主要重点是精确的行为研究：使用单针手动探针，以确保每个单独巢房封盖的绝对完整性，最大限度地减少因结构损坏造成的假阳性。
- 如果您的主要重点是抗病性：严格解释24小时清除率；一个揭开巢房但未清除死亡幼虫的蜂群并未表现出完全的卫生行为。
精密探针是观察蜂群与科学量化其健康遗传潜力之间的桥梁。
总结表：
| 特征 | 单针手动探针 | 多针针刺测试工具（例如，100针） |
|---|---|---|
| 主要用途 | 高精度行为研究 | 商业选育和大规模蜂场测试 |
| 主要优点 | 最大的封盖完整性；无结构损坏 | 高吞吐量；消除时间延迟变量 |
| 机制 | 每个巢房单独致命穿刺 | 同时对大面积幼虫造成均匀创伤 |
| 数据准确性 | 非常适合单个巢房分析 | 在群体范围的定量评分方面表现优异 |
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参考文献
- María Alejandra Palacio, Enrique Bedascarrasbure. Changes in a population of <i>Apis mellifera</i> L.selected for hygienic behaviourand its relation to brood disease tolerance. DOI: 10.1051/apido:2000139
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
