在遗传样本采集中,精度至关重要。 在采集瓦螨样本时使用细毛刷的主要功能是手动将成年雌螨与蜂巢碎片分离,而不会造成物理损伤。该工具可确保螨虫成为下游分析稳定、高质量的生物样本。
细毛刷是一种精密的隔离工具,可保持螨虫组织的物理完整性。这种结构保存是成功提取基因组 DNA 的关键先决条件,而提取基因组 DNA 对于准确检测耐药性至关重要。
螨虫分离的机制
选择性地从碎片中分离
蜂巢底部通常覆盖着蜡、花粉和一般碎屑的混合物。
细毛刷使采集者能够以高精度筛选这种混合物。
它能够特异性地识别和检索成年雌螨,同时将周围的废物留在原地。
非破坏性处理
与机械真空吸尘器或粗扫不同,细毛刷施加的力很小。
这确保了分离过程是非破坏性的。
目标是移动螨虫,而不是压碎其外骨骼或破坏其内部器官。
与基因分析的关键联系
保持组织完整性
采集样本的物理状态直接影响实验室阶段的成功与否。
耐药性检测依赖于分析螨虫的遗传构成。
使用细毛刷可确保组织保持完整,防止样本因物理损坏而降解。
DNA 提取的基础
高质量的基因组 DNA 提取需要完整的样本。
如果在采集过程中压碎了螨虫,破裂组织释放的酶会在 DNA 送达实验室之前将其降解。
细毛刷是质量控制的第一道防线,为基因组测序奠定了可行的基础。
应避免的常见陷阱
混淆工具尺寸
将用于螨虫的“细毛刷”与用于扫蜂的大型养蜂刷混淆至关重要。
虽然养蜂刷专为工蜂的韧性而设计,但它们对于单独提取螨虫来说过于粗糙。
使用过大或过硬的工具很可能会在样本被采集之前就将其损坏。
过度施压的风险
即使使用正确的工具,人为错误仍然存在风险。
应使用毛刷“引导”或“扫”动螨虫,而不是将其压住。
用毛刷施加向下的压力会像使用错误的工具一样轻易地损坏内部组织。
为您的目标做出正确的选择
为确保您的采样能够提供关于耐药性的可行数据,请遵循以下原则:
- 如果您的主要重点是 DNA 质量:优先使用轻柔的扫动动作,以确保螨虫在保存前保持存活或物理完整。
- 如果您的主要重点是速度:放慢速度;匆忙进行分离阶段会增加压碎样本的风险,从而使后续昂贵的实验室工作变得毫无价值。
通过将采集毛刷视为精密仪器而非清洁工具,您可以保护准确诊断耐药性所需的遗传数据。
摘要表:
| 特征 | 在螨虫采集中的目的 | 对基因分析的影响 |
|---|---|---|
| 精细的刷毛 | 防止压碎螨虫的外骨骼 | 最大限度地减少因组织破裂引起的 DNA 降解 |
| 高精度 | 将螨虫与蜡和碎片分离 | 减少样本污染,实现更清洁的测序 |
| 非破坏性 | 保持物理组织完整性 | 确保高产的基因组 DNA 提取 |
| 手动控制 | 允许精确选择样本 | 提高实验室诊断的成功率 |
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参考文献
- Anabel Millán‐Leiva, Joel González‐Cabrera. New PCR–RFLP diagnostics methodology for detecting Varroa destructor resistant to synthetic pyrethroids. DOI: 10.1007/s10340-018-0964-2
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