主要目的使用含有70%乙醇的酒精收集瓶是为了作为蜜蜂样本的即时生物固定剂和保存剂。这种方法能有效防止像瓦螨这样的外部寄生虫逃离样本,同时抑制可能降解标本的微生物生长。通过在收集时快速稳定蜜蜂,乙醇确保了实验室后续寄生虫和病原体的计数准确且能代表蜂群的实际健康状况。
70%乙醇作为稳定剂,充当生物活动的“秒表”,保存样本的物理和遗传状态,以确保实验室分析能够反映野外条件。
为疾病分析保存样本完整性
防止寄生虫丢失
样本立即浸入70%乙醇中对于准确的瓦螨监测至关重要。溶液会立即固定样本,防止移动的寄生虫从宿主身上脱落并在运输过程中丢失。
便于机械分离
乙醇在固定样本的同时,也有助于处理阶段。它可以通过机械搅动有效地将螨虫与蜜蜂分离,使计数过程更有效率和准确。
稳定病原体形态
对于显微镜分析,物理结构至关重要。乙醇溶液能保持孢子虫孢子的形态,确保它们在高倍镜诊断过程中保持可识别和可计数的状态。
保护遗传物质
阻止生物降解
除了目视检查,乙醇对于分子生物学也至关重要。工业级乙醇能迅速渗透蜜蜂组织,抑制酶活性并阻止微生物繁殖。
保存线粒体DNA
通过检查微生物生长和酶降解,该溶液可防止线粒体DNA(mtDNA)降解。这确保了遗传物质的完整性得以维持,以进行复杂的分子实验和测序。
准确性的关键考虑因素
立即固定的必要性
该方法的有效性取决于其即时性。收集和固定之间任何延迟都可能导致寄生虫脱落或DNA降解,使样本不可靠。
标准化减少误差
使用标准化的瓶子和溶液可以消除现场操作造成的变量。这减少了随机误差,并确保在偏远或高海拔地区收集的样本与在易于到达的地区收集的样本在生物学上具有可比性。
确保调查数据的可靠性
为了最大化您的蜜蜂疾病调查的价值,请根据您的分析目标调整您的保存方法:
- 如果您的主要重点是寄生虫负荷计算:依靠70%乙醇防止瓦螨脱落,并便于准确计数所需的机械分离。
- 如果您的主要重点是显微镜病原体诊断:使用此浓度固定孢子虫孢子的形态,确保它们在到达显微镜之前不会降解。
- 如果您的主要重点是分子遗传学:确保充分渗透组织,抑制酶活性,并保持mtDNA完整性以进行测序。
现场标准化是保证实验室精确性的唯一途径。
摘要表:
| 功能 | 对调查准确性的益处 |
|---|---|
| 即时固定 | 防止瓦螨在运输过程中逃离样本。 |
| 形态稳定 | 保持孢子虫孢子可识别,以便清晰的显微镜诊断。 |
| 生物抑制 | 阻止酶活性,以保存线粒体DNA(mtDNA)。 |
| 机械辅助 | 便于在实验室计数时更容易地将寄生虫与蜜蜂分离。 |
| 标准化 | 减少现场误差,以获得不同地区的一致数据。 |
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参考文献
- Kirsten S. Traynor, Dennis vanEngelsdorp. Multiyear survey targeting disease incidence in US honey bees. DOI: 10.1007/s13592-016-0431-0
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .