在瓦螨(Varroa destructor)采样中使用70%乙醇具有关键的双重功能:即时生物固定和用于分离的化学预处理。它能立即杀死蜜蜂和螨虫,以保持样本的状态,同时作为溶剂削弱寄生虫与宿主之间的物理结合,从而实现准确计数。
核心要点 70%的乙醇不仅仅是一种防腐剂;它是一种活性化学剂,可破坏螨虫跗节垫的附着力。这确保了在摇晃样本时,螨虫能有效脱落,防止假阴性,并确保对侵染率进行准确评估。
乙醇的双重作用:固定和预处理
即时生物固定
乙醇溶液的主要功能是在收集样本的瞬间“固定”样本的状态。
接触后,酒精会立即杀死蜜蜂及其身上的螨虫。这可以防止螨虫迁移或逃逸,确保样本反映了收集时确切的侵染水平。
防止样本分解
除了即时固定外,酒精还起到防腐剂的作用。
如果样本必须在分析前运输或储存,这一点至关重要。乙醇可以防止蜜蜂的生物分解,在样本到达实验室之前保持样本的结构完整性。
螨虫脱落机制
削弱跗节附着力
使用乙醇最技术性的优势在于其对螨虫的理化作用。
瓦螨使用特化的跗节垫附着在蜜蜂身上。乙醇溶液能化学性地削弱这些跗节垫与蜜蜂体表之间的附着力,从而有效地减弱寄生虫的抓握力。
降低表面张力
乙醇会改变收集容器内的流体动力学。
通过降低液体的表面张力,该溶液可以更好地渗透到蜜蜂和螨虫之间。当与机械搅拌(摇晃)结合时,这确保了螨虫能够从蜜蜂身上物理分离,而不是被困在气泡中或因摩擦而保持附着。
最大化洗脱效率
使用乙醇的最终目标是提高“洗脱效率”——即螨虫成功从蜜蜂身上洗脱的比率。
由于附着力在化学上被削弱,随后的搅拌过程变得更加有效。这确保了最终计数包括可能隐藏或附着的螨虫,从而提供统计学上准确的侵染率。
操作注意事项和权衡
搅拌的必要性
虽然乙醇削弱了附着力,但它并不能单独被动地清除所有螨虫。
要使螨虫脱落,仍然需要进行主动的机械搅拌(摇晃容器)。仅依靠浸泡而不搅拌会导致不准确的低计数。
破坏性采样
这种方法会对样本蜜蜂造成致命伤害。
与可能允许蜜蜂存活的“糖滚法”(sugar roll)不同,乙醇洗涤是一种破坏性测试。它牺牲少量工蜂,以获得对蜂群健康的高度准确的了解。
目视验证
使用透明塑料容器是一个支持化学过程的战略选择。
透明度允许研究人员目视检查乙醇量是否足以覆盖蜜蜂,以及样本在运输过程中是否保持完整,而无需打开密封并存在污染风险。
为您的目标做出正确选择
在设计采样方案时,请考虑您在准确性与蜂群保护方面的优先事项。
- 如果您的主要重点是最大化准确性:使用70%乙醇洗涤法,因为它能化学性地确保最高的螨虫脱落率并消除迁移。
- 如果您的主要重点是蜂群保护:考虑非致命方法,如糖滚法,但要接受计数可能不如化学洗涤精确。
- 如果您的主要重点是延迟分析:依赖乙醇法,因为其防腐特性允许您在野外批量收集样本,以便稍后在实验室计数。
通过结合化学固定和机械分离,乙醇洗涤法仍然是可靠量化瓦螨侵染的黄金标准。
总结表:
| 特征 | 在瓦螨采样中的功能 | 对结果的影响 |
|---|---|---|
| 生物固定 | 立即杀死蜜蜂和螨虫 | 防止螨虫迁移和逃逸 |
| 防腐 | 抑制生物分解 | 允许长期储存和运输 |
| 化学溶剂 | 削弱螨虫跗节垫附着力 | 确保螨虫易于从宿主身上脱落 |
| 表面张力 | 降低液体表面张力 | 提高搅拌过程中的洗脱效率 |
| 视觉清晰度 | 用于透明容器 | 允许验证样本完整性 |
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参考文献
- Fábio de Assis Pinto, Lídia Maria Ruv Carelli Barreto. Infestation rate of the mite Varroa destructor in commercial apiaries of the Vale do Paraíba and Serra da Mantiqueira, southeastern Brazil. DOI: 10.1590/1678-7264
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .