塑料收集容器上的通风孔的主要目的是在临时储存和运输阶段维持工蜂的生命。这些孔允许必要的空气流通,防止窒息,并确保标本在到达实验室之前保持存活。
为什么这很重要:保持标本存活不仅仅是为了保存;它是分子准确性的先决条件。未经保存的立即死亡会导致快速的生物降解,从而损害诊断测试所需的病毒 RNA。
气流与数据完整性之间的关键联系
保护病毒 RNA 质量
使用通风容器最紧迫的原因是 RNA 的化学不稳定性。
根据标准规程,病毒 RNA 的完整性对于准确的分子诊断至关重要。
如果在运输过程中由于缺氧导致蜜蜂死亡,酶促过程将立即开始降解这种遗传物质。
确保准确的诊断结果
通风可以让您在能够精确停止之前,让生物“时钟”继续运行。
通过让蜜蜂存活,您可以确保样本在实验室中被快速冷冻之前不会降解。
这直接关系到后续病毒分析中生成数据的可靠性。
通风之外:容器材料的作用
防止环境污染
虽然孔提供了空气,但坚固的塑料结构可以阻挡外部变量。
使用工业级无菌塑料可防止环境微生物的交叉污染。
这确保了在分析过程中检测到的任何细菌都来自蜜蜂本身,而不是来自肮脏的采样工具或周围环境。
标准化样本量
这些容器的物理设计通常包括体积刻度。
这允许快速标准化;例如,100 毫升的体积大致相当于 300 只蜜蜂。
使用体积作为计数的代理可确保不同实验批次之间的一致性和可比性。
理解权衡:通风与乙醇
区分活体运输(通风)和现场固定(乙醇)至关重要。
“活体”规程(通风)
此方法专门用于需要高质量 RNA 或活体微生物组分析的研究。
目标是将蜜蜂活体运输到冰箱(例如 -80°C)或 -20°C 环境。
这里需要通风以防止过早死亡和分解。
“固定”规程(乙醇)
如果您使用的是 70% 的乙醇,那么您优先考虑的是 DNA 的完整性和形态保存(例如,用于处理瓦螨或鼻螨孢子)。
乙醇会立即脱水并固定组织,杀死蜜蜂但保存特定的生物标记。
请勿将通风容器用于乙醇储存,因为这会导致泄漏和蒸发,从而损害防腐剂浓度。
根据您的目标做出正确的选择
根据您需要提取的具体生物材料来选择您的容器策略。
- 如果您的主要重点是病毒 RNA 分析:使用通风塑料容器,在蜜蜂被深度冷冻在实验室之前保持其存活。
- 如果您的主要重点是 DNA 或形态(螨虫/孢子):使用装有 70% 乙醇的密封非通风容器,在现场立即固定组织。
总结:通风孔是“活体捕获”规程的专用工具,是蜂箱和实验室冰箱之间的关键桥梁,可保护脆弱的 RNA 免于降解。
总结表:
| 特征 | 通风容器(活体规程) | 带乙醇的密封容器(固定规程) |
|---|---|---|
| 主要目标 | 维持生命以获得高质量的 RNA/微生物组 | 保存 DNA 和形态特征(螨虫) |
| 主要优点 | 防止窒息和快速腐烂 | 即时组织固定和稳定 |
| 机制 | 空气流通/氧气交换 | 化学脱水 |
| 样本目标 | 病毒 RNA、活体肠道细菌 | DNA、瓦螨、鼻螨孢子 |
| 储存要求 | 快速运往 -80°C/-20°C 冰箱 | 室温或冷藏 |
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参考文献
- Ana Molineri, Marcelo Signorini. Risk factors for the presence of Deformed wing virus and Acute bee paralysis virus under temperate and subtropical climate in Argentinian bee colonies. DOI: 10.1016/j.prevetmed.2017.02.019
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