双层纱布或工业滤布在 Nosema 孢子提取中的作用是作为精密过滤器。其具体目的是将微米大小的孢子与在研磨的蜜蜂组织液中发现的较大生物碎屑分离开来。没有这一步,样本就会过于污染,无法进行可靠的科学观察。
研磨的蜜蜂组织含有重要的杂质,如几丁质和毛发,这些杂质在显微镜下会遮挡视线。双层纱布可滤除这些较大的残留物,同时允许孢子通过,从而形成准确分析所需的清晰悬浮液。
生物杂质的挑战
研磨组织的性质
当蜜蜂组织被研磨以进行提取时,产生的液体并非纯净。它主要由结构性碎屑组成,特别是几丁质碎片和毛发。
显微镜检查的障碍
这些杂质之所以有问题,是因为它们通常比目标孢子更大或光学密度更高。如果留在液体中,它们就会充当视觉“噪音”,物理上遮挡孢子,使得几乎不可能获得清晰的视野。
精密过滤的工作原理
选择性渗透性
双层纱布或工业滤布的编织方式至关重要。它的孔隙度足以让微米大小的 Nosema 孢子随液体一起通过织物。
截留残留物
同时,双层结构为较大的颗粒创造了一个屏障。它有效地截留了干扰性的组织残留物——几丁质和毛发——阻止它们进入最终样本。
清晰悬浮液的价值
实现形态学分析
此过程的最终目标不仅是提取,更是分析。清晰的孢子悬浮液是研究孢子形态(形状和结构)的先决条件。
减少假阴性
通过去除可能隐藏孢子的碎屑,您可以降低在观察过程中遗漏孢子的风险。过滤可确保您在显微镜下看到的内容代表实际的孢子数量,而不是一片碎屑。
理解权衡
分层的重要性
建议特别要求使用双层纱布。单层可能过于疏松,允许细小碎屑通过并污染样本。
孢子损失的可能性
相反,使用过于致密的材料或增加过多的层数可能会截留孢子本身。双层法在流动性和保留性之间取得了必要的平衡。
根据您的目标做出正确的选择
为确保您的提取产生可用数据,请根据您的具体目标考虑以下几点:
- 如果您的主要重点是视觉清晰度:依靠过滤步骤去除几丁质和毛发,否则它们会阻碍您在显微镜下的视野。
- 如果您的主要重点是形态学准确性:使用过滤后的悬浮液,可以无障碍地观察孢子的形状和结构,这在充满碎屑的样本中是不可能的。
此过滤步骤是原始、混乱的生物样本与清洁、科学上可行的标本之间的桥梁。
摘要表:
| 特征 | 在 Nosema 提取中的功能 |
|---|---|
| 材料 | 双层纱布或工业滤布 |
| 主要目标 | 将微米大小的孢子与生物碎屑分离开来 |
| 目标残留物 | 几丁质碎片和蜜蜂毛发 |
| 关键优势 | 实现清晰的形态学分析并减少假阴性 |
| 关键平衡 | 孢子的高渗透性与截留较大杂质 |
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参考文献
- Delka Salkova, Kalinka Gurgulova. Detection of Varroa destructor Mite and Nosema spp. in Bee Samples From Bulgaria. DOI: 10.51458/bstd.2022.24
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
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