在密封容器中使用乙醇洗脱是分离蜜蜂体外寄生虫的关键机械和化学过程。将样品浸入 70% 的乙醇中，并在密封环境中剧烈摇晃，可以显著降低表面张力并固定生物组织。这种双重作用迫使螨虫（如瓦螨和热带瓦螨）从蜜蜂身体上脱落，并悬浮在溶液中，以便进行准确量化。
核心要点 准确计数寄生虫依赖于克服螨虫对宿主的物理抓附；乙醇作为表面活性剂和固定剂，可以松动这种附着，而密封容器则允许进行必要的剧烈机械搅拌，以清除寄生虫而不丢失样品。
乙醇的化学机制
降低表面张力
在这种情况下，70% 乙醇的主要作用是降低液体表面张力。
瓦螨等寄生虫会紧紧附着在蜜蜂的外骨骼上。乙醇溶液比水更有效地渗透到寄生虫和宿主之间的空隙中，打破了帮助螨虫附着的物理表面张力。
作为固定剂
乙醇可作为蜜蜂和螨虫的快速固定剂和杀灭剂。
这确保了样品在收集后立即保持其生物状态。通过固定组织，乙醇可以防止寄生虫腐烂，确保它们在搅拌过程中保持完整以便计数，而不会分解。
保持遗传完整性
除了简单的物理保存外，70% 的乙醇还可以保护生物大分子。
对于需要实验室分析的样品，乙醇可确保螨虫体内的 DNA 不会降解。如果样品需要运输数天进行分子鉴定或病原体筛查，这一点至关重要。
密封容器的机械作用
实现剧烈搅拌
容器的密封性不仅仅是为了储存；它是一种机械必需。
为了清除被乙醇化学松动的寄生虫，样品需要剧烈摇晃。密封环境允许操作员将显著的动能施加到液体上，而不会泄漏化学品或丢失生物标本。
防止溶剂蒸发
乙醇是一种挥发性溶剂，暴露在空气中会迅速蒸发。
使用化学稳定的密封容器（如塑料瓶或玻璃瓶）可防止蒸发。这可以维持乙醇的浓度，确保其在整个运输和测试阶段保持有效的 70% 水平，以实现分离和保存。
便于过滤
在许多系统中，密封容器是“洗涤套件”的一部分，该套件与网状过滤器（通常是 #8 网孔）集成在一起。
容器内的搅拌允许较小的螨虫通过过滤器，而较大的蜜蜂则被截留。这种物理过滤将悬浮的寄生虫与宿主分离，简化了计数过程。
理解权衡
致命采样
乙醇洗脱最显著的权衡是它是一种致命方法。
与糖水法或二氧化碳注射法不同，此过程会杀死样品中的蜜蜂。它提供了更高的准确性和更好的保存效果，但代价是收集的蜜蜂样品。
化学安全性和稳定性
虽然有效，但乙醇在易燃性和密封完整性方面需要小心处理。
如果在运输过程中容器密封失效，乙醇可能会泄漏或蒸发。这可能导致样品干燥，使螨虫无法计数，并破坏分子分析所需的 DNA。
根据您的目标做出正确的选择
要为您的寄生虫监测选择正确的设备和方案，请考虑您的最终目标：
- 如果您的主要重点是即时现场准确性：优先选择带有集成 #8 网孔过滤器的容器，以便在酒精洗涤后立即快速分离和计数螨虫。
- 如果您的主要重点是实验室研究：使用化学稳定的密封玻璃瓶，以防止蒸发并确保 DNA 保存以进行分子诊断。
- 如果您的主要重点是蜂群生存：请注意，此方法是致命的；确保样本量在统计学上具有显著性，但足够小，以免损害蜂群的整体实力。
乙醇化学释放与密封容器机械分离的结合，仍然是高精度寄生虫量化的金标准。
总结表：
| 机制 | 主要功能 | 关键优势 |
|---|---|---|
| 70% 乙醇 | 降低表面张力并作为固定剂 | 将螨虫从蜜蜂身上分离并保存 DNA/组织 |
| 密封容器 | 防止蒸发并实现搅拌 | 确保溶剂浓度一致且无泄漏地摇晃 |
| 机械摇晃 | 施加动能 | 物理清除寄生虫以进行准确量化 |
| 网孔过滤 | 基于尺寸的分离 | 将悬浮的螨虫与蜜蜂分离以便于计数 |
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参考文献
- Gülnur KALAYCI, Fatih Arslan. Koloni Kaybından Etkilenen Türk Arılıklarında Viral ve Paraziter Patojenlerin Rolü. DOI: 10.9775/kvfd.2020.24154
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
