使用 100 毫升密封塑料瓶和低温储存的技术必要性在于同时保持样本的物理密封性和生物稳定性。 密封瓶创造了一个坚固、防漏的环境，能够容纳大约 300 只成年蜜蜂的标准样本，而 4 °C 的储存温度则抑制了组织腐烂。这些措施共同保护了像灰飞虱属等寄生虫的 DNA 完整性，并防止了在运输过程中丢失瓦螨等外部害虫。
核心要点 准确的实验室诊断完全取决于样本能否以离开蜂箱时的状态送达。该方案通过防止生物降解（腐烂）和物理样本丢失（泄漏），最大限度地降低了假阴性的风险。
100 毫升密封容器的作用
确保物理密封
密封塑料瓶的主要功能是作为一个坚固、防漏的容器。在野外条件下，样本会穿越崎岖的地形；高密封性的旋盖确保容器在振动或压力变化时保持关闭状态。
这种物理密封对于保留外部寄生虫至关重要。如果没有牢固的密封，像瓦螨或蜂虱这样的螨虫可能会从宿主蜜蜂身上脱落并在运输过程中丢失，导致虫害计数不准确。
标准化样本量
100 毫升的体积经过专门校准，可容纳大约300 只成年工蜂。
这种标准化对于统计准确性至关重要。通过持续收集这个特定体积的样本，实验室可以高度可靠地确定不同蜂箱的虫害率（例如，每 100 只蜜蜂的螨虫数量）。
低温储存（4 °C）的必要性
抑制生物腐烂
一旦收集了蜜蜂，生物分解就会立即开始。将样本储存在4 °C可以有效减缓导致组织腐烂的新陈代谢过程。
通过抑制酶活性和细菌生长，低温确保蜜蜂及其寄生虫在形态检查时保持物理完整。
保存 DNA 完整性
对于内部寄生虫，特别是微孢子虫，如灰飞虱属，目视检查通常不足。
低温储存可以保存这些病原体的DNA 完整性。这使得以后可以进行灵敏的分子诊断（如 PCR），从而确保物种级别的鉴定，如果遗传物质在高温下降解，则无法实现。
理解权衡
“冷链”的脆弱性
虽然 4 °C 对于短期到中期运输有效，但它依赖于一致的“冷链”。
如果温度显著波动或在较长时间内高于 4 °C，软组织将迅速降解。这可能导致无法区分不同的寄生虫种类，或导致组织溶解，使目视计数复杂化。
机械分离的考虑
虽然密封瓶可以防止丢失，但瓶子本身并不能将寄生虫与宿主分离。
操作人员必须了解，该瓶子是一个运输容器。对于有效的实验室分析，这种物理方法通常与化学剂（如乙醇）或机械振荡相结合，以去除附着在蜜蜂身上的寄生虫，利用瓶子安全的体积来容纳分离的悬浮液。
根据您的目标做出正确的选择
为确保您的调查结果有效，请根据您的具体诊断重点应用这些方案：
- 如果您的主要重点是外部寄生虫计数（瓦螨）：优先考虑瓶子的密封完整性，以确保在崎岖的运输过程中不会丢失任何螨虫。
- 如果您的主要重点是病原体鉴定（灰飞虱/病毒）：优先严格遵守4 °C 温度限制，因为遗传物质在环境热量下会迅速降解。
通过严格维持密封、寒冷的环境，您可以将简单的蜜蜂收集转化为科学上有效的数据点。
摘要表：
| 特征 | 技术要求 | 主要目的 |
|---|---|---|
| 容器类型 | 100 毫升密封塑料瓶 | 确保物理密封并防止瓦螨丢失 |
| 样本量 | 约 300 只成年工蜂 | 标准化虫害率数据以获得统计准确性 |
| 储存温度 | 4 °C（冷链） | 抑制组织腐烂并防止细菌生长 |
| 诊断目标 | DNA 保存 | 为灰飞虱和病毒的 PCR 检测保持完整性 |
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参考文献
- Occurrence of most important Western honey bee (Apis mellifera) parasites (Nosema spp. and Varroa destructor) in Latvia. DOI: 10.22364/eeb.15.25
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
