针刺杀幼虫法是一种精确的手动技术，用于定量评估蜜蜂蜂群的社会免疫和卫生行为。它包括使用细小的昆虫针刺穿封盖的育雏格，杀死里面的幼虫以模拟感染，然后测量工蜂检测和清除死亡组织的速度。
核心要点 该方法为“卫生行为”提供了一个可量化的基准——这是一种蜜蜂主动清除患病幼虫的遗传特征。通过测量蜂群在 24 小时内的清洁速度，育种者可以选择天生对疾病具有更高抵抗力的品系，从而有效打破感染循环。
测定的必备工具
要进行有效的针刺杀幼虫测试，需要特定的硬件来确保数据在不同蜂群之间具有标准化和可比性。
高精度针
该方法的主要工具是细小的昆虫针或专门的插针工具。这些针必须足够细，能够刺穿蜡封盖，而不会对周围的细胞壁造成过度的结构损坏。
目标是给幼虫造成“标准化的机械损伤”。这模拟了因疾病而导致的死亡，从而触发蜜蜂的清洁反应。
标准化蜂箱硬件
准确的测试依赖于使用标准化蜂箱，例如 Dadant 或 Langstroth 型号。
这些蜂箱具有统一、可拆卸的巢框。这种结构允许技术人员在不干扰整个蜂群的情况下轻松取出封盖的育雏巢脾进行手动干预和观察。
文档设备
由于测试依赖于视觉比较，因此通常会使用摄影记录设备。
技术人员在插针后立即拍摄巢脾照片，并在测试期结束后再次拍摄。这确保了对已清理细胞数量的客观计数。
操作流程
该过程旨在将模糊的观察转化为关于蜂群抵抗潜力的硬数据。
1. 巢脾选择
技术人员从蜂箱中取出一张带有封盖育雏的巢脾。
重点是找到处于特定发育阶段（蛹或幼虫）的育雏区域。这里的均匀性对于获得一致的结果至关重要。
2. 模拟感染（插针）
技术人员使用细针手动刺穿特定数量的细胞（例如 50 或 100 个）的封盖。
针必须足够深入以杀死下面的幼虫或蛹。此操作模仿了死亡或患病育雏的存在，为工蜂创造了“统一的刺激”。
3. 24 小时清洁期
杀死幼虫后，立即将巢脾放回蜂箱。
蜂群将保持不受干扰整整24 小时。在此期间，有卫生行为的工蜂必须通过封盖检测到死亡的幼虫，打开细胞，并清除残骸。
4. 定量评估
24 小时后，取出巢脾并再次检查（或拍照）。
已清理（干净）的细胞数量相对于已插针的总细胞数量进行计数。清除率高的蜂群（例如 >95%）被认为具有高度卫生性，适合育种。
理解权衡
虽然针刺杀法是核心技术工具，但重要的是要认识到它与其他测定方法的局限性。
劳动密集型
与批量冷冻法不同，针刺杀法需要对每一个细胞进行手动操作。
这使得它对于大规模操作来说非常耗时。它需要稳定的双手和耐心，以确保有效杀死每个选定的幼虫而不破坏巢脾。
可变的刺激
杀死幼虫的方式存在轻微的不一致风险。
如果针头错过了幼虫的重要器官，它可能存活或缓慢死亡，从而延迟蜜蜂的反应。这可能会引入比冷冻杀幼虫测定更难控制的变量。
为您的目标做出正确选择
针刺杀幼虫法是一种强大的工具，但其应用取决于您的具体育种或研究目标。
- 如果您的主要重点是小规模育种：此方法非常理想，因为它只需要最少的设备（只需针头），并且允许您测试特定的蜂王，而无需购买液氮或冷冻机。
- 如果您的主要重点是高精度研究：使用此方法来收集关于检测和开盖行为的详细数据，因为机械损伤为蜜蜂提供了非常具体的触发因素。
- 如果您的主要重点是大规模商业筛选：您可能会发现此过程太慢；如果您需要快速评估数百个蜂群，请考虑研究批量冷冻法。
最终，对于旨在通过遗传而非化学治疗来改善蜂群健康的育种者来说，针刺杀法仍然是最易于获得的入门方法。
总结表：
| 步骤 / 工具 | 详细信息 | 目的 |
|---|---|---|
| 昆虫针 | 高精度、细规格针头 | 标准化机械杀死幼虫 |
| 巢脾选择 | 封盖育雏（蛹/幼虫） | 确保对清洁蜜蜂的统一刺激 |
| 插针过程 | 刺穿 50-100 个细胞 | 模拟疾病感染进行测试 |
| 清洁期 | 24 小时窗口 | 工蜂检测和清除碎屑的时间范围 |
| 评估 | 已清理细胞的百分比 | 量化蜂群的卫生遗传特征 |
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参考文献
- Marcelo Lopes-da-Silva, L.C. Stefaniak. Honey Bees of Santa Catarina, Brazil, have only African mitochondrial DNA. DOI: 10.1590/s0102-09352012000200039
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
