高密封性的塑料瓶和乙醇防腐剂在现场采样中至关重要，因为它们可以立即阻止生物活性，并在运输过程中物理固定样本。通过在防漏容器中使用96% 的乙醇溶液，研究人员可以防止组织分解，确保微孢子虫孢子保持其结构完整性，以便进行准确的实验室定量。
现场数据的可靠性仅取决于样本到达时的物理状况。密封牢固和高质量化学保存的结合是抑制降解的唯一有效方法，确保实验室结果能够反映采集时真实的感染水平。
在现场保存生物完整性
立即固定组织
蜜蜂被采集的那一刻，生物分解就开始了。乙醇作为一种即时固定剂，能够阻止生理过程，并在采集地点有效地杀死样本。
这种快速固定对于大规模采样至关重要。它可以防止蜜蜂腹部（微孢子虫感染的主要部位）的自然分解。
抑制细菌生长
没有防腐剂，细菌生长和酶活性会破坏样本。乙醇创造了一个抑制生物降解的环境，确保样本随时间保持稳定。
这种保护可以持续数周，为从偏远蜂场到实验室的运输提供了充足的时间，而不会丢失数据。
保持孢子结构
特别是对于微孢子虫，孢子的完整性至关重要。主要参考资料强调，96% 的乙醇可确保孢子结构完整性保持不变。
如果蜜蜂组织降解，孢子可能难以识别或计数。定量显微镜分析需要完整的孢子才能确定感染的严重程度。
确保运输过程中的数据准确性
高密封性瓶子的作用
乙醇的有效性完全取决于它是否留在容器中。高密封性的塑料瓶是防止挥发性乙醇溶液蒸发或泄漏所必需的。
如果密封失效，乙醇浓度会下降或完全消失。这将重新启动分解过程，使样本在到达实验室之前就变得毫无用处。
保证定量有效性
现场采样的最终目标是获得准确的数据。使用坚固的瓶子和防腐剂保证了后续分析的准确性，无论是分子检测还是显微计数。
通过消除样本降解这一变量，研究人员可以确信在实验室观察到的孢子计数能够准确反映现场的真实感染水平。
理解权衡
乙醇浓度敏感性
虽然主要参考资料推荐96% 的乙醇以获得最佳的固定和结构保存效果，但值得注意的是，有时也会使用较低浓度（如 75%）进行一般性保存。
然而，对于大规模操作中快速、深层组织固定而言，依赖较低浓度可能效果不佳。坚持使用较高浓度（96%）可为微孢子虫孢子提供最高的结构稳定性保证。
依赖物理操作
即使是最好的高密封性瓶子，如果未正确关闭，也可能失效。“高密封性”是指瓶子的能力，但操作员失误仍然存在风险。
在大规模采样中，一个松动的瓶盖可能会破坏整个数据集。严格检查瓶盖密封的重要性与乙醇本身同等重要。
根据您的目标做出正确的选择
可靠的微孢子虫定量需要一个将样本稳定性放在首位的方案。
- 如果您的主要关注点是显微定量准确性：优先使用96% 的乙醇，以确保孢子在计数时具有最大的结构完整性。
- 如果您的主要关注点是长途运输：确保您的塑料瓶被评定为高密封性，以防止防腐剂在数周内蒸发。
实验室的成功取决于现场保存的质量。
总结表：
| 特征 | 规格 | 在微孢子虫采样中的作用 |
|---|---|---|
| 防腐剂 | 96% 乙醇 | 阻止分解并保持孢子结构完整性。 |
| 容器类型 | 高密封性塑料 | 防止挥发性防腐剂蒸发和泄漏。 |
| 固定速度 | 即时 | 在采集点停止生物活性。 |
| 稳定性持续时间 | 数周 | 允许从偏远蜂场进行长途运输。 |
| 主要目标 | 定量准确性 | 确保实验室计数反映真实的现场感染水平。 |
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参考文献
- Micaela Ceccotti, Agostina Giacobino. Dinámica estacional de Varroa destructor y Nosema sp en colonias de Apis mellifera en clima templado de Argentina. DOI: 10.30972/vet.3315889
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
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