测量蜂蜜中的 5-羟甲基糠醛 (HMF) 需要在紫外 (UV) 光谱范围内测量吸光度,因此必须使用石英比色皿。 具体来说,分析测量的是 284 nm 和 336 nm 波长下的吸光度。标准的玻璃或塑料比色皿会在这些波长下吸收紫外光,阻挡信号,导致无法准确测量。只有石英具有必要的透光性,能够让紫外光穿过样品到达检测器。
核心要点 要确定蜂蜜的新鲜度,必须测量 284 nm 波长下的 HMF 吸光度,该波长深处于紫外光谱范围内。由于标准玻璃和塑料在 300 nm 以下对紫外光不透明,使用它们会导致信号完全丢失;石英是唯一足够透明的标准实验室材料,可以在此特定波长下提供准确的数据。
光学测量物理学
标准材料的局限性
在可见光范围内,玻璃和高品质塑料是透明的。然而,在紫外范围内的光学特性会发生巨大变化。
标准玻璃和塑料比色皿有一个“紫外截止点”,通常在 300 nm 到 320 nm 左右。低于此阈值,材料本身会吸收光能,而不是让其通过。
石英的优势
石英(熔融石英)在深紫外范围(通常低至 190 nm)内仍能保持高透光率。
由于 HMF 的主要测量发生在 284 nm,石英充当了清晰的窗口,而玻璃则充当了墙壁。使用非石英比色皿将测量容器本身的吸光度,而不是蜂蜜的吸光度。
HMF 测量为何重要
质量和新鲜度的标志
HMF 是果糖分解产生的副产物,该过程受热和酸性加速。
新鲜的生蜂蜜几乎不含 HMF。HMF 水平升高表明蜂蜜已暴露于高温、加工不当或储存时间过长。
定量标准
国际法规,如《食品法典》标准,通常对 HMF 设定严格的限制(通常低于 40 mg/kg),以确保商业等级和纯度。
需要精确测量以确定蜂蜜是否符合这些出口法规,或者是否因陈化而分解。
测量方法
双波长分析
紫外分光光度法依靠两个不同的读数来确保准确性:
- 284 nm: 这是 HMF 的特征吸收峰。
- 336 nm: 这用于测量蜂蜜中其他成分的背景干扰。
最终结果是通过从 284 nm 的读数中减去 336 nm 的吸光度来计算的。由于两个波长都在紫外光谱范围内,因此这两个步骤都需要石英。
样品制备至关重要
在样品到达石英比色皿之前,必须对其进行澄清。
使用卡雷兹试剂 I 和 II 来沉淀蛋白质和胶体。这种预处理会得到澄清的滤液,确保吸光度读数是由于 HMF 含量而不是悬浮颗粒(浊度)散射光。
理解权衡
成本与准确性
石英比色皿比玻璃或塑料昂贵得多,也更易碎。它们需要小心处理和清洁,以避免划痕,划痕会折射光线并改变读数。
然而,对于紫外法(White 法),这种成本是不可避免的,因为它是高精度、合规分析的标准。
替代方法
需要注意的是,并非所有 HMF 测试都需要石英。
- Winkler 法: 该方法在比色反应后,在 550 nm(可见光)下使用分光光度计。由于 550 nm 是可见光,因此在此处技术上可以使用高质量的玻璃或塑料比色皿。
- 快速筛查: 反射光度计使用化学试纸进行快速现场分析,完全无需比色皿。
为您的目标做出正确选择
要根据您的具体需求选择正确的设备和方法,请考虑以下因素:
- 如果您的主要重点是国际合规性: 使用带石英比色皿的紫外分光光度法,因为它提供了符合《食品法典》等官方标准所需的高精度数据(284 nm 峰值)。
- 如果您的主要重点是降低成本: 考虑Winkler 法,该方法在 550 nm(可见光谱)下进行操作,并可能允许使用成本较低的光学元件,但它涉及不同的化学试剂。
- 如果您的主要重点是现场筛查: 使用带试纸的反射光度计,它们无需液相色谱或易碎的石英玻璃器皿即可提供快速结果。
总而言之,选择石英不是因为它耐用,而是因为它是在紫外光下验证蜂蜜纯度所必需的唯一清晰通道。
总结表:
| 特性 | 石英比色皿 | 玻璃/塑料比色皿 |
|---|---|---|
| 紫外透光性 | 高(低至 190 nm) | 差(截止点约 300-320 nm) |
| HMF 测量(284 nm) | 必需/透明 | 不兼容/不透明 |
| 主要应用 | 紫外分光光度法 | 可见光(Winkler)法 |
| 可靠性 | 合规性金标准 | 仅限于特定波长 |
| 成本与耐用性 | 成本较高;易碎 | 成本较低;可抛弃型 |
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参考文献
- Aslı Özkök, Kadriye Sorkun. CHEMOMETRIC EVALUATION OF THE GEOGRAPHICAL ORIGIN OF TURKISH PINE HONEY. DOI: 10.3153/fh18027
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
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