为什么蜜蜂采样需要密封塑料杯和低温冰箱？专家保存指南

密封塑料杯和低温冰箱是必不可少的工具，它们就像生物活动的“暂停按钮”，能将样本的状态精确地保存在采集时的状态。

这种组合能有效地终止蜜蜂和任何寄生螨虫的生理活动。通过防止分解和固定标本，这一过程确保了螨虫不会脱落或消失，从而保证了后续定量分析和形态学鉴定的准确性。

核心要点 蜜蜂数据的完整性——无论是计算螨虫数量还是分析遗传物质——完全依赖于在采集后阻止生物变化。密封杯提供物理隔离，防止交叉污染，而冰箱（通常为-20°C）则通过化学方式固定样本，阻止分解和寄生虫流失。

保存物理和生物完整性

该采样方案的主要目标是确保在实验室中分析的标本与在现场采集的标本完全相同。

立即施加低温（约-20°C）对于终止蜜蜂及其寄生虫的生理活动至关重要。

如果样本保持活跃或处于温热状态，寄生螨虫可能会从蜜蜂宿主身上脱落。冷冻可以将螨虫固定在原位，确保实验室计数能够真实反映蜂群的真实感染水平。

蜜蜂在死亡后会迅速分解，这会影响形态学鉴定。

低温储存可抑制组织生物分解。这种保存对于保持蜜蜂的物理结构以进行准确的目视检查和计数是必要的。

使用密封的标准化塑料杯可将样本与外部环境隔离开。

这种物理屏障对于准确检测病原体载量至关重要，例如微孢子虫（Nosema species）或慢性蜜蜂麻痹病毒（CBPV）。它确保在实验室中检测到的病原体确实来自该特定蜂群，而不是来自邻近样本或处理工具。

除了可见的寄生虫外，研究人员还经常分析蜜蜂的化学和遗传构成。储存方法对这些微观数据的有效性有显著影响。

工业级无菌塑料容器可防止环境微生物的引入。

在分析蜜蜂微生物组时，检测到的细菌必须来自蜜蜂的内部系统或体表。密封的无菌容器可确保结果不会因杂质或不洁的采样工具而产生偏差。

将储存环境维持在-8°C至-40°C之间可抑制表面酶的降解。

此温度范围还可以最大限度地减少挥发性脂质成分的流失。保存这些化学标记物可确保实验数据准确反映蜜蜂在捕获时实际的生理状态。

虽然标准的“密封杯和冰箱”方法非常可靠，但不同的分析目标需要对该方案进行特定调整。

虽然-20°C足以进行螨虫计数和一般形态学研究，但对于所有分子研究可能不够冷。

对于涉及敏感病毒或病原体的长期储存，通常需要超低温冰箱（-80°C）。这种极低的温度能更有效地固定分子结构，防止核酸在多年筛查中降解。

冷冻会破坏蜜蜂的生命，这对于大多数结构和化学分析是可以接受的。

然而，如果主要目标是获得高质量、无降解的RNA用于病毒滴度监测，那么在采集后立即冷冻可能并非总是最佳方法。在这些特定情况下，会使用带糖饲料的通风容器将蜜蜂活体运往实验室，因为保持宿主存活可以防止RNA在提取前降解。

根据您打算从样本中提取的具体数据来选择您的储存和采集方案。

可靠的数据始于经过物理隔离和热稳定处理的样本，以严格限制生物变化。