知识 为什么使用 70% 乙醇处理无刺蜂样本?确保野外采集的 DNA 完整性和组织保存
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技术团队 · HonestBee

更新于 3 天前

为什么使用 70% 乙醇处理无刺蜂样本?确保野外采集的 DNA 完整性和组织保存


70% 乙醇是无刺蜂样本野外采集的最终化学固定剂和保存剂。其主要功能是通过快速渗透组织和变性蛋白质,立即阻止生物降解。此过程能有效中和酶,否则这些酶会破坏 DNA,从而确保样本的遗传完整性在从野外到实验室的运输过程中得以保存。

野外条件通过高温和时间对脆弱的生物样本构成严重威胁。70% 乙醇通过充当即时化学“冷冻”来解决这一问题,通过抑制核酸酶来锁定基因组数据,否则核酸酶会分解 DNA。

保存机制

要理解为什么 70% 乙醇是标准,必须了解它在分子水平上如何与生物材料相互作用。

快速组织渗透

保存剂的有效性取决于速度。使用 70% 乙醇是因为它能快速渗透生物样本。

这种速度确保了在自然腐败过程获得动力之前,保存剂就能到达细胞层面。

蛋白质变性

一旦进入组织,乙醇就会充当变性剂。它会物理改变蜜蜂细胞内蛋白质的结构。

通过解开这些蛋白质的结构,乙醇使其在生物学上失活,从而有效地暂停细胞活动。

核酸酶抑制

蛋白质变性的最关键结果是内源性核酸酶的抑制

核酸酶是蜜蜂体内天然存在的、会消化核酸的酶。通过立即使这些酶失活,乙醇阻止它们降解基因组分析所需的 DNA。

克服环境挑战

野外采集通常发生在对生物保存不利的环境中。乙醇充当了抵御这些外部因素的屏障。

抵御高温

无刺蜂通常在高温气候下采集。高温会自然加速导致组织分解和 DNA 断裂的化学反应。

乙醇提供了化学稳定性,可以抵消在野外数小时或数天内高温造成的降解作用。

保护基因组信息

使用这种消耗品的最终目标是保存组织(如腿或触角)中的遗传数据。

通过在运输过程中保持这些特定组织的完整性,研究人员可以确保材料的质量足够高,以便后续进行复杂的实验室分析。

理解限制

虽然 70% 乙醇是标准,但其功效在很大程度上取决于正确的使用。

必须立即使用

乙醇不是修复性化学品;它是预防性化学品。它无法逆转已经发生的损害。

因此,“权衡”是一个操作性的问题:保存剂必须在采集后立即使用。任何延迟都会让核酸酶开始工作,从而大大降低乙醇处理对 DNA 保存的有效性。

为您的目标做出正确选择

为了最大限度地提高您的野外工作的价值,请根据您的具体分析需求应用此保存策略。

  • 如果您的主要重点是基因组分析:捕获后立即使用 70% 乙醇,以抑制核酸酶并防止 DNA 降解。
  • 如果您的主要重点是形态学研究:确保腿和触角等附肢完全浸没,以在运输过程中保护它们免受高温引起的腐蚀。

可靠的数据始于在野外对您的样本进行即时且正确的化学固定。

总结表:

特征 机制 对蜜蜂采样的益处
组织渗透 快速进入细胞 采集后立即阻止衰败过程。
蛋白质变性 结构改变 使引起生物降解的酶失活。
核酸酶抑制 酶中和 防止核酸(DNA/RNA)被消化。
热稳定性 化学固定 保护样本免受高温影响。
多功能性 多组织保存 非常适合腿和触角的基因组分析。

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参考文献

  1. Nadine C. Chapman, Benjamin P. Oldroyd. Anthropogenic hive movements are changing the genetic structure of a stingless bee (Tetragonula carbonaria) population along the east coast of Australia. DOI: 10.1007/s10592-017-1040-9

本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .

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