95% 的乙醇是分子分析领域采集的行业标准。它是一种快速的化学固定剂，能渗透组织，立即停止生物过程。
通过使标本脱水和使蛋白质变性，95% 的乙醇能有效阻止分解，确保为后续的实验室工作保存高质量的基因组 DNA。
核心要点 虽然较低浓度的乙醇可以物理保存标本以供计数，但95% 的乙醇是保护遗传蓝图所必需的。它能特异性抑制破坏 DNA 的酶，在运输和储存过程中保持基因组的结构完整性。
分子保存机制
要理解 95% 的浓度为何至关重要，我们必须了解乙醇如何与蜜蜂和瓦螨的生物组织相互作用。
抑制核酸酶活性
样本遗传物质的主要威胁来自核酸酶。
这些是生物体内天然存在的酶，在生物体死亡后会分解 DNA 和 RNA。
95% 的乙醇能有效抑制这种核酸酶活性。通过关闭这些酶，乙醇可以防止样本“消化”自身的遗传密码。
快速组织脱水
水是发生降解的介质。
95% 的乙醇能快速渗透蜜蜂和螨虫的外骨骼和组织，取代细胞内的水分。
这种深度脱水能有效阻止细菌生长和酶促水解，从而在时间上有效地“冻结”样本的生物化学状态。
蛋白质变性
高浓度乙醇能使蛋白质变性。
这个过程会使蛋白质的复杂结构展开，使其在生物学上失活。
这有助于样本的结构稳定性，确保基因组 DNA 在后续的分子生物学分析（如 PCR 或测序）中保持完整。
理解权衡
虽然 95% 的乙醇在 DNA 保存方面更优越，但了解它与其他采集方法之间的区别很重要。
95% 用于遗传学 vs. 70% 用于计数
不同浓度的乙醇有明显的功能差异。
70% 的乙醇通常用作“润湿剂”，以减少粘附力，便于将螨虫从蜜蜂身上洗下进行物理计数。
然而，95% 的乙醇是一种“固定剂”。它优先考虑化学稳定性而非机械分离。
组织硬度
95% 乙醇引起的快速脱水会使标本变脆。
虽然这对于提取 DNA 非常好，但如果您打算以后将标本固定在针上或进行形态学研究，它们可能会变得更易碎，难以处理。
为您的目标做出正确选择
选择正确的乙醇浓度完全取决于您在采集样本后打算如何处理它们。
- 如果您的主要重点是分子分析（DNA/RNA）：请使用95% 的乙醇。这能确保核酸酶的抑制，并保存最高质量的基因组模板。
- 如果您的主要重点是物理计数：请考虑使用70% 的乙醇。它能更好地作为润湿剂，分离螨虫，并防止高浓度乙醇引起的快速蒸发。
最终，95% 的乙醇充当分子保护罩，牺牲物理柔韧性以保证遗传数据的安全。
总结表：
| 浓度 | 主要功能 | 作用机制 | 最佳用途 |
|---|---|---|---|
| 95% 乙醇 | 分子固定剂 | 抑制核酸酶和蛋白质变性 | DNA/RNA 分析和基因组测序 |
| 70% 乙醇 | 润湿剂 | 减少粘附和防止蒸发 | 物理计数和螨虫清洗 |
| 冷冻 | 物理储存 | 通过温度阻止生物衰败 | 大批量样本的长期储存 |
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参考文献
- Natapot Warrit, Chariya Lekprayoon. Genetic subpopulations of<i>Varroa</i>mites and their<i>Apis cerana</i>hosts in Thailand. DOI: 10.1051/apido:2005051
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .
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