在深度冷冻之前运输新鲜花粉会立即损害样品的完整性。您必须使用配备干冰的冷藏箱,将样品快速冷却至-20°C以下的温度。需要这种特定的热环境来阻止生物活性,抑制蛋白质降解,并保持准确的实验室分析所需的化学成分。
新鲜花粉是一种高度易腐烂、具有生物活性的物质,一旦收集就开始降解。使用干冰可确保深度冷冻状态,将样品的原始化学和遗传特征“锁定”,防止分解,否则分解将使植物鉴定和农药残留测试无效。
保存生物和化学稳定性
阻止蛋白质降解
新鲜花粉含有对热敏感的生物活性蛋白质。在环境温度下,这些蛋白质会迅速分解。
通过使用干冰将温度降至-20°C以下,您可以有效地暂停这个生物钟。这可以防止蛋白质变性,确保样品在收集时保持其原始状态。
保持化学成分
花粉的化学组成复杂且不稳定。如果没有快速冷却,酶促反应会改变样品的化学特征。
深度冷冻可抑制这些酶促活性。这对于农药残留测试尤其关键,可确保您要查找的毒性化合物在样品到达实验室之前不会分解。
防止 DNA 断裂
对于先进的分析,例如DNA 条形码,遗传物质必须保持完整。
需要-18°C或更低的温度来防止植物 DNA 分子降解。如果在运输过程中 DNA 降解,物种鉴定将变得不可靠或不可能。
确保物理和微生物完整性
抑制微生物生长
花粉是一种营养丰富的介质,如果不加以控制,会促进细菌和真菌的快速生长。
干冰提供的极寒温度可防止微生物繁殖。这可以保存真菌谱系特征,使研究人员能够准确分析原始真菌频率,而不会受到运输过程中二次污染或霉菌生长的干扰。
保存物理特性
实验室任务通常涉及显微鉴定、分离和染色。
这些过程依赖于花粉保持其原始的质地、颜色和物理结构。冷藏可防止水分引起的酶促反应,这些反应会降解这些物理特征,确保视觉评估的可靠性。
了解后勤权衡
冷藏和冷冻的区别
区分标准冷藏(0–7°C)和深度冷冻(-20°C)很重要。
虽然标准冷链(0–7°C)可以抑制某些农药的降解,但通常不足以保证长期的蛋白质和 DNA 稳定性。干冰更优越,因为它能达到完全生物静止所需的显著更低的温度。
水分管理
虽然冷冻是必不可少的,但水分是花粉保存的敌人。
低温冷冻有助于防止水分引起的酶促反应。但是,样品必须密封在冷藏箱内的无菌容器中,以防止冷凝或冰晶形成改变样品的质量或成分。
为您的目标做出正确的选择
为确保您的数据有效,请根据您的分析目标调整您的运输方法:
- 如果您的主要重点是基于 DNA 的物种鉴定:您必须使用干冰将样品保持在-18°C以下,以防止遗传物质断裂。
- 如果您的主要重点是农药残留分析:您必须优先快速冷却以抑制酶促分解,确保在实验室检测到的污染物水平与田间条件相符。
- 如果您的主要重点是显微分析:您必须保持冷冻状态,以保存视觉分类所需的质地和颜色。
严格遵守深度冷冻冷链是确保您的实验室结果反映田间生物现实的唯一方法。
总结表:
| 保存因素 | 要求 | 失败的影响 |
|---|---|---|
| 温度 | 低于 -20°C (干冰) | 生物活性继续;样品变质 |
| 蛋白质稳定性 | 深度冷冻 | 活性蛋白质变性与分解 |
| DNA 完整性 | ≤ -18°C | DNA 断裂;物种鉴定无效 |
| 化学成分 | 快速冷却 | 农药残留的酶促分解 |
| 微生物控制 | 极寒 | 细菌和真菌过度生长;污染 |
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参考文献
- Matthew Smart, Marla Spivak. Land use in the Northern Great Plains region of the U.S. influences the survival and productivity of honey bee colonies. DOI: 10.1016/j.agee.2016.05.030
本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .