知识 为什么必须用干冰处理蜜蜂群落样本?保持分子完整性以获得准确的诊断
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技术团队 · HonestBee

更新于 4 天前

为什么必须用干冰处理蜜蜂群落样本?保持分子完整性以获得准确的诊断


即时保存至关重要,因为蜜蜂样本中的生物标志物一旦从蜂群中取出就会开始降解。您必须用干冰处理样本并将其转移到-80°C的储存中,以阻止生化活动并保护核酸的完整性。

核心见解 准确的分子检测依赖于蜂群健康状况的“冷冻快照”。如果没有立即深度冷冻,RNA和病毒基因特征在室温下会迅速衰减,导致诊断结果不可靠或完全不准确。

样本完整性的科学原理

保护脆弱的核酸

使用干冰和深度冷冻设备的主要原因是为了保存核酸,特别是RNA。与DNA不同,RNA在化学上不稳定,极易降解。

如果样本保持在室温下,蜜蜂细胞中天然存在的酶会开始分解这些遗传物质。立即冷却可防止数据丢失。

捕获病原体状态

为了解蜂群的健康状况,科学家们会查看基因表达谱。这包括宿主(蜜蜂)和存在的任何病毒。

这些表达谱是动态的;它们会迅速响应压力或环境变化而改变。立即冷冻样本可以“锁定”生物状态,确保后续检测反映蜜蜂在取样时的确切状况。

深度冷冻的操作优势

便于样本处理

除了分子保存外,深度冷冻还会影响蜂巢材料的物理结构

在极低的温度下,蜂蜡——在室温下粘稠且难以处理——会变得非常脆。这种物理变化使得组件能够高效分离,例如将蜂粮颗粒与蜂巢分离,而不会堵塞设备或损害样本结构。

确保提取纯度

当蜂蜡因深度冷冻而变脆时,它可以与其他蜂巢产品干净地分离。

这可以防止在揉搓较暖、有弹性的蜂蜡时经常发生的“涂抹”或污染。对于涉及蜂巢食物储存(如蜂粮)的分析,这确保了颗粒完整性得以保持,以进行准确评估。

理解权衡

完整性的代价

从田间到实验室维持“冷链”在后勤上要求很高。它需要收集期间使用干冰,以及储存专用的超低温冰箱(-80°C)。

标准冷冻的风险

一个常见的误区是认为标准家用冰箱(-20°C)足以满足所有类型的分析。虽然标准冷冻可能足以进行简单的解剖,但它通常不足以防止敏感病毒RNA在长时间内的降解。

未能达到深度冷冻温度可能导致病原体筛查出现假阴性。

根据您的目标做出正确的选择

要确定您的冷链储存方案的严格程度,请确定您的主要目标:

  • 如果您的主要重点是分子分析(RNA/病毒):您必须立即使用干冰并在-80°C下储存,以防止基因谱降解。
  • 如果您的主要重点是分离蜂粮或蜂蜡:您应该利用深度冷冻使蜂蜡变脆,防止设备堵塞并确保干净分离。

最终,您的诊断数据的可靠性取决于您在收集后能多快地停止生物钟。

摘要表:

因素 室温/标准冰箱 干冰和深度冷冻(-80°C)
RNA/病毒稳定性 快速降解;数据不可靠 生物状态“锁定”;高完整性
蜂蜡质地 有弹性且粘稠;堵塞设备 易碎;易于分离
样本纯度 交叉污染风险高 蜂粮和蜂巢分离干净
测试准确性 频繁假阴性 精确的分子和病原体分析

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参考文献

  1. Merav Gleit Kielmanowicz, J.M. Ballam. Prospective Large-Scale Field Study Generates Predictive Model Identifying Major Contributors to Colony Losses. DOI: 10.1371/journal.ppat.1004816

本文还参考了以下技术资料 HonestBee 知识库 .

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